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表皮細胞(貂肺上皮細胞)培養(yǎng)
表皮細胞(貂肺上皮細胞)培養(yǎng)
1．取材：取外科植皮或手術(shù)殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產(chǎn)流產(chǎn)兒皮膚更好，切成0.5～1平方厘米小塊。
2．EDTA處理：先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。
3．冷消化：換入0.25%胰蛋白酶中，置4℃過夜。
4．(貂肺上皮細胞)分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。
5．溫消化：取出表皮單獨處理，用剪刀剪成更小的塊后，置入新的0.25%胰蛋白酶中，37℃再消化30～60分鐘。
6．用吸管輕輕反復(fù)吹打，使成細胞懸液。
7．培養(yǎng)液(貂肺上皮細胞)：通過80目不銹鋼紗網(wǎng)濾過后，低速離心，吸上清，直接加入Eagle液和20%小牛血清，制成細胞懸液，接種入碟皿中，CO2溫箱培養(yǎng)。
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